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腦立體定位儀實驗過程中的注意事項

更新時間:2022-01-07   點擊次數(shù):1404次
   腦立體定位儀是一種用于微創(chuàng)操作大腦的方法,通過腦圖譜和三維坐標(biāo)系可以準(zhǔn)確地定位大腦內(nèi)部的小目標(biāo),并對其執(zhí)行一些操作,例如消融(切除),活檢,病變,注射,刺激,植入等。哺乳動物的大腦是所有器官中最復(fù)雜的一部分,結(jié)構(gòu)上分為很多區(qū)域和核團,在需要對某個特定核團進行研究的時候就需要通過立體定位技術(shù)對其進行精確定位和操作。
  
  在神經(jīng)科學(xué)的研究方法中,為了使各種處理手段(給藥、毀損、病毒注射等)或信號采集(微電極、探針)到達目的腦區(qū)的相應(yīng)位置,需要使用腦立體定位技術(shù)。
  
  下面詳細介紹腦立體定位實驗過程中的注意事項:
  1、首先根據(jù)以上的注意事項找準(zhǔn)腦立體定位點。
  
  2、熒光、有色染料預(yù)實驗:在病毒注射之前,為了確定核團定位是否正確,推薦神經(jīng)順行示蹤的DiI染料于注射后1周,神經(jīng)逆行示蹤的熒光金(Flourogold)染料于注射后2周切片,并對照圖譜確認注射的核團位點無誤,再進行病毒注射,可有效提高病毒標(biāo)記的成功率。冰凍切片時注意,先從所要核團外開始切(還不到核團所在層面),拿到的切片對照圖譜中的一些參照物來判斷核團是否準(zhǔn)確(對照物可選大而清晰的海馬、視交叉,腦室、核團附近的特殊結(jié)構(gòu)如纖維索等等),切片同時注意調(diào)節(jié)凍臺角度,使切片角度與圖譜一致。
  
  3、注意小鼠的狀態(tài):由于俯臥體位以及腦立體定位儀的夾持,容易造成小鼠窒息死亡,因此需要隨時確認小鼠氣道通暢。另外,對于手術(shù)切開的部位,應(yīng)適當(dāng)?shù)渭由睇}水,防止傷口干燥。
  
  4、大鼠顱骨水平位定位操作:定位時將大鼠固定成顱骨水平位后,先定位到前囟,以前囟為原點,向前或向后、向左或向右、向下(先在顱骨上打孔)到達核團位置,需要強調(diào)的是,坐標(biāo)是以前囟為原點,而不是以鉆孔后的腦表面為原點。
  
  5、熟能生巧:通過多加練習(xí),最后能根據(jù)所用動物的體重對坐標(biāo)做相應(yīng)的修正,保證一定得準(zhǔn)確率,立體定位也就成功了。

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